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新闻中心

人活化素A(Activin-A)ELISA定量检测试剂盒操作流程

发布时间:2018-01-24浏览次数:1543返回列表


    中文名:人活化素A(Activin-A)elisa试剂盒

    别名:人活化素A(Activin-A)ELISA Kit

    供货商:上海樊克

    产品规格:96T/48T

    保存:2-8℃

    试剂盒成分:酶标板,试剂,标准品等。

    样本:血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。

    预期应用:ELISA法定量测定血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中的含量。

    elisa试剂盒特点:灵敏性高、特异性强、重复性好。

    Elisa试剂盒产地:加拿大、德国、意大利等进口知名品牌现货供应以及国产各类Elisa试剂盒。

    Elisa试剂盒供应种类:1.人Elisa试剂盒、2.动物Elisa试剂盒、3.食品Elisa试剂盒、4.植物Elisa试剂盒、5.农产Elisa试剂盒、6.微生物细胞Elisa试剂盒、7.其他各类Elisa试剂盒。

    产品用途:仅供科研使用,不得用于医学诊断,使用前仔细阅读本说明书。





    人活化素A(Activin-A)ELISA定量检测试剂盒试剂准备:

    试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。

    1. 标准品复溶:试剂盒提供6管标准品,每管已标定浓度,并且冻干。实验前在每个标准品管中加入0.5mL样本稀释液,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动助其溶解,使其恢复为每个标准品管身标注的浓度。

    2. 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

    人活化素A(Activin-A)ELISA试剂盒实验原理

    本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人活化素A(Activin-A)水平。用纯化的人活化素A(Activin-A)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入活化素A(Activin-A),再与HRP标记的活化素A(Activin-A)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的活化素A(Activin-A)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人活化素A(Activin-A)浓度。

    人活化素A(Activin-A)ELISA定量检测试剂盒操作流程:

    1、加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

    2、温育:用封板膜封板后置 37℃温育30分钟。

    3、配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

    4、洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

    5、加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

    6、显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10 分钟。

    7、终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

    8、测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

    人活化素A(Activin-A)ELISA试剂盒注意事项:

    1.不同厂家生产的试剂盒因生产工艺和操作方法略有不同,务必按照所用试剂盒严格操作,否则容易产生检测结果的不确定性。

    2.若不同批号人ELISA试剂盒的不同组分(A液或酶工作液),或不同试剂的不同组分进行交叉使用,有可能出现显色浅或本底高,花板等情形。

    3.反应时间的误差,做大量标本时,第一孔和后一孔以及一些特殊标本可能影响较大。

    4.临界值附近标本波动为正常现象,任何试剂均不可避免。可以考虑将标本做奇数次复检。

    5.加样时样品量误差,对于阴或很阳的标本影响不大,但对阈值附近的标本影响极大,建议校对加样器。